將鏈霉菌 Streptomyces sp .NJwGY3665 菌種接到葡萄糖0.5%，牛肉膏 0.5 %,蛋白胨 0.5%，NaCl0.5%，瓊脂

　　1.5%、水 96.5%，pH6.0的葡萄糖營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中，進(jìn)行斜面培養(yǎng)，在28℃下培養(yǎng) 2天。取斜面菌種，加入2～3ml無(wú)菌水（每18×180mm的試管斜面菌種），用接種環(huán)輕輕將菌苔洗下，制成孢子懸液，取 0.5ml孢子懸液接種到含 40ml葡萄糖 1.0%，玉米漿 3%，CaCO31%、酵母膏 0.5%、 NaCl0.1%、水 94.4%，pH7.0的液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng) 3天，培養(yǎng)溫度為 28℃，轉(zhuǎn)速為 200rpm。再將 5ml種子液接入到裝液量為100ml含有葡萄糖 4.0%，淀粉 2.0%，玉米漿 2.0%、酵母膏 0.1%、黃豆餅粉 2%、NaCl0.5%、CaCO31.5%、 NH4Cl0.5%、磷酸二氫鉀 0.2%、硫酸銨 0.3%、水 86.9%的發(fā)酵培養(yǎng)集中，在28℃，180rpm，pH6.0的條件下?lián)u床發(fā)酵培養(yǎng) 5天，獲得含有恩拉霉素的菌絲體，將 1g發(fā)酵后的菌絲體，用去離子水清洗，懸浮在 30mL乙醇中，乙醇的體積分?jǐn)?shù)為 70%，pH為 4.5，用 KQ-100型超聲機(jī)進(jìn)行微生物細(xì)胞破碎 15min，得到含有恩拉霉素的混合物，將破碎后的混合物用 HYG-Ⅱa型搖瓶柜振蕩（調(diào)節(jié)搖瓶柜的溫度和轉(zhuǎn)速分別為 15℃，180rpm）提取

　　1小時(shí)，得到含有恩拉霉素的提取液，然后將含有恩拉霉素的提取液在 1500r/min的轉(zhuǎn)速下離心15min，收集含有恩拉霉素的上清液，將上清液在 30℃下減壓濃縮至無(wú)液體，得到恩拉霉素粗提品。

　　將大孔樹脂按照常規(guī)處理方法進(jìn)行預(yù)處理后，裝入帶有恒溫保護(hù)套的玻璃柱子，用氯化鈉濃度為 0.09mol/L及甲醇體積分?jǐn)?shù)為 70%的甲醇水溶液以 60mL/h的速度泵入柱子來(lái)完成平衡。恩拉霉素的粗提品溶解在 10mL乙醇中，放在柱子的頂端，靜止吸附 2小時(shí)，用0.5L的洗脫劑（甲醇/氯化鈉濃度為0.09mol/L及甲醇體積分?jǐn)?shù)為 70%的甲醇水溶液的體積比為 1:9）梯度洗脫，將洗脫液用旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器減壓濃縮蒸干，產(chǎn)率達(dá)到 60%。

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